ACETATO DI METILE urinario in GC-FID Codice GC02510
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1 ACETATO DI METILE urinario in GC-FID Codice GC02510 BIOCHIMICA L acetato di metile, a temperatura ambiente si presenta come un liquido volatile e incolore; è un composto molto infiammabile ed irritante. Trova largo uso come solvente per vernici, resine e colle essendo relativamente meno tossico di altri solventi clorurati. Il metodo proposto determina l acetato di metile iniettando in GC/FID un aliquota di campione urinario precedentemente trattata in opportuno solvente. EUREKA srl LAB DIVISION VAT N info@eurekaone.com Head Quarter: Via Enrico Fermi Chiaravalle (AN) ITALY Tel Fax Questo prodotto adempie a tutte le esigenze della Direttiva 98/79/CE sui dispositivi medico-diagnostici in vitro (IVD). La dichiarazione di conformità CE è disponibile su richiesta. Release N 001 Acetato di Metile urinario in GC/FID Giugno
2 CARATTERISTICHE DEL KIT Principio del metodo : Il presente metodo consente di determinare l acetato di metile urinario in GC-FID. Il campione viene trattato con un opportuno solvente e poi viene direttamente iniettato in GC. Recupero del Metodo: 95% Sensibilità del Metodo: 20 mg/l Range Dinamico del Metodo: mg/l Valori di Riferimento: n.d. CV%: Contenuto della Confezione : 7.3% intra serie 10.8% inter serie Tutti i reagenti sono pronti all uso e stabili 3 anni a Temperatura 20 C. Reagente A Soluzione Diluente, 1 x 200 ml Reagente B Soluzione Test / Standard Chimico, 1 x 5 ml Stoccare a 2-8 C Per il prelievo del Reagente B, il tappo a chiusura ermetica necessita l uso della siringa Hamilton da 100 ul Cod. S81000 Dotazione strumentale minima richiesta : Strumento GC/FID Computer gestionale Dotazione opzionale : Autocampionatore Modalità di prelievo : Alla fine del turno lavorativo, raccogliere 10 ml di urine in una provetta idonea. Il trasferimento del campione nel contenitore deve essere effettuato nel minor tempo possibile. Stabile 1 giorno a 2 8 C e 1 mese a 20 C. 2
3 IMPORTANTE: USARE UNICAMENTE PROVETTE IN VETRO AD OGNI STEP NON USARE ASSOLUTAMENTE PROVETTE IN PLASTICA PROCEDURA PREANALITICA Preparazione della Soluzione Test. Dispensare in una provetta di vetro da 10ml: 1800 µl di Reagente A Soluzione Diluente 200 µl di Reagente B Soluzione Test Trasferire il surnatante nelle vials standard da 2 ml. Agitare al Vortex per 10 secondi Centrifugare a 4000 rpm per 5 minuti Iniettare 1 µl della soluzione nel gascromatografo GC-FID ed attendere la stampa del cromatogramma. Verificare che il tempo di ritenzione della soluzione sia simile a quello riportato in figura 1. Se l esito è positivo si può procedere alla seduta analitica. Se cosi non fosse verificare la funzionalità del sistema analitico. PROCEDURA ANALITICA FASE 1: Preparazione della soluzione Standard di Calibrazione a 465 mg/l Dispensare in una provetta di vetro da 10ml: 200 µl di Acqua di grado HPLC 200 µl di Reagente B Soluzione Test Dispensare in una provetta di vetro: Agitare al Vortex per 10 secondi 900 µl di Urina esente da Acetato di Metile 100 µl di Soluzione Test precedentemente diluita Agitare al Vortex per 10 secondi IMPORTANTE: Tale soluzione Standard di Calibrazione va preparata di volta in volta Per verificare che l urina sia effettivamente esente da Acetato di Metile, preparare un Bianco: 900 µl di Urina esente da Acetato di Metile 100 µl di H 2 O di grado HPLC Qualora il Bianco urina presentasse il picco dell Acetato di Metile, procedere all individuazione quantitativa per differenza tra le aree/altezze dei picchi dell Acetato di Metile presenti nell urina arricchita e nel bianco. Release N 001 Acetato di Metile urinario in GC/FID Giugno
4 Dispensare in una provetta di vetro: Standard di Calibrazione Controllo Campione Bianco Standard di Calibrazione 200 µl Controllo 200 µl Campione 200 µl Bianco 200 µl Reagente A Soluzione Diluente 1800 µl 1800 µl 1800 µl 1800 µl Chiudere ermeticamente le vials Agitare al Vortex per 10 secondi Centrifugare 5 minuti a 4000 rpm Prelevare tutto il surnatante e trasferirlo nelle vials standard da 2 ml. Iniettare 1 µl nel GC-FID. Preparare la lista di lavoro e avviare la serie secondo le specifiche del sistema N.B.: il campione è stabile circa 2 ore, pertanto va iniettato subito dopo la preparazione. N.B.: al termine della preparazione degli Standard chiudere la vial della soluzione Test/Standard Chimico con parafilm e stoccare immediatamente a 2 8 C. Release N 001 Acetato di Metile urinario in GC/FID Giugno
5 ACETATO DI METILE - Avvertenze REAGENTE B : SOLUZIONE TEST / STANDARD CHIMICO ACETATO DI METILE mg/l SETTAGGIO DEL GAS-CROMATOGRAFO : Colonna Rxi-624SilMS 30 m x 0,32 mm x 1,80 µm (condizionata) Temperatura iniettore: 180 C Rapporto di Splittaggio: In: OFF 0 ON split 5 Temperatura 40 C x 8,9 minuti + 20 C/min fino a 250 C x 0 minuti + 50 C/min fino a 280 C x 0 minuti (corsa 17 minuti) Flusso He in colonna: 1 ml/min Temperatura detector (FID): 240 C Range (sensibilità) Detector: 12 (max) CONDIZIONAMENTO DELLA COLONNA Rxi-624 SilMS Seguire le prescrizioni del costruttore. PULIZIA DELLA COLONNA E DELLA SIRINGA La siringa dell autocampionatore va lavata con ACETONE. Disconnettere il detector. Tenere la colonna alla massima temperatura per 5 minuti. La colonna va stoccata a temperatura ambiente con setti su entrambe le estremità in modo da evitare l ingresso di aria in colonna. PARAMETRI COMPUTER GESTIONALE SECONDO LE SPECIFICHE DEL SOFTWARE GESTIONALE 5
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7 ACETATO DI METILE URINARIO (Cromatogrammi di riferimento) Fig. 1 : Soluzione Test Fig. 2 : Standard di Calibrazione R.T. 3.7 ACETATO DI METILE R.T. 3.7 ACETATO DI METILE 465 mg/l 7
8 ACETATO DI METILE URINARIO (Cromatogrammi di riferimento) Fig. 3 : Campione urinario R.T. 3.7 ACETATO DI METILE 230 mg/l 8
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