ESAME DEI TESSUTI. I parte

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1 ESAME DEI TESSUTI I parte Per riconoscere le varietà di tessuti presenti nel preparato bisogna porsi i seguenti quesiti: A) Trattasi di TESSUTO EPITELIALE? Il tessuto epiteliale è riconoscibile perché gli elementi cellulari che lo costituiscono sono tutti a reciproco contatto tra loro, con interposizione di minima sostanza intercellulare. Le sezioni dei preparati che vi sono presentati alle esercitazioni hanno spessore (6-8 µm), il che consente la evidenziazione del nucleo in tutte le cellule epiteliali, anche se sono su piani di sezione diversi (specialmente modificando la messa a fuoco, che si ottiene ruotando avanti e indietro la vite micrometrica). Con l'epitelio potrebbero confondersi a) il tessuto muscolare liscio (vedi oltre), quando i suoi elementi siano stati sezionati trasversalmente alla lunghezza delle cellule muscolari. In questo caso, però, ogni cellula muscolare è circondata da una trama di fibre connettive reticolari, mentre per le cellule epiteliali, a contatto diretto tra di loro, il connettivo è presente solo in un versante (quello basale); b) il tessuto adiposo, le cui cellule, però, sono molto più grandi (circa 5 volte), hanno un citoplasma vuoto (sul motivo vedi la parte delle tecniche istologiche), nucleo periferico e sono anch esse, una ad una, circondate da tessuto connettivo reticolare. A1 -Trattasi di EPITELIO DI RIVESTIMENTO? In tal caso le cellule epiteliali, disposte a reciproco contatto, dovranno formare una membrana cellulare, estesa in senso bidimensionale (larghezza-lunghezza). Il terzo parametro (spessore dell'epitelio) è meno sviluppato degli altri e dipende dal numero degli strati degli elementi cellulari presenti. -Trattasi di epitelio di rivestimento semplice oppure stratificato? Se trattasi di epitelio stratificato: a) la stratificazione è reale, ossia dovuta a diverse file di cellule epiteliali (in tal caso, alcune cellule toccheranno la membrana basale, ma non raggiungeranno la superficie libera dell' epitelio, altre raggiungeranno la superficie libera ma non la membrana basale, altre avranno posizione intermedia alle due file precedentemente indicate); b) oppure è fittizia? In quest' ultimo caso, tutte le cellule toccano la membrana basale, ma solo alcune, le più alte, raggiungono la superficie libera; i nuclei, avendo le cellule altezza differente, saranno situati a livelli differenti e daranno 1' impressione, a piccolo ingrandimento, di un epitelio stratificato, mentre si tratta,in effetti, di un epitelio semplice, ma a più file di nuclei (epitelio pseudostratificato: trachea, bronchi, ecc...). Le cellule dell epitelio di rivestimento potranno risultare fortemente appiattite e disposte in unico strato (epitelio pavimentoso semplice: negli alveoli dei polmoni, mesoteli, ed endoteli), oppure appariranno poligonali per reciproca compressione nei vari strati (epitelio pavimentoso composto). Nel caso dell' epitelio pavimentoso composto, le cellule più superficiali subiranno l'azione delle forze di tensione di superficie e quindi appariranno più appiattite rispetto alle cellule profonde che risulteranno più precisamente poligonali. Tra l'altro, procedendo dalla profondità verso la superficie, le cellule costitutive presenteranno una tendenza alla cheratinizzazione. Tale processo di cheratinizzazione non è completo nelle cellule dell'epitelio pavimentoso composto che tappezza superfici costantemente umidificate dal secreto delle ghiandole (ep. del cavo orale e dell' esofago, ep. dell' ultimo segmento dell intestino retto, ep. della vagina). Metodo di riconoscimento: presenza di cellule nucleate fino all'ultimo strato. Un tipico epitelio

2 pavimentoso composto completamente cheratinizzato è quello dell'epidermide, idoneo a vivere a contatto dell' aria. Metodo di riconoscimento: presenza di lamine cornee sopra l'epitelio. Nel caso dell'epitelio polimorfo, tipico delle vie urinarie, si ha una modifica dello spessore in base al diverso stato di distensione della vescica. Diverso è, quindi, nelle varie situazioni fisiologiche, il numero di file di nuclei, ma un criterio per riconoscerlo sempre è notare sulla superficie la presenza di cellule cupoliformi, grandi, con asse longitudinale parallelo alla superficie e, a volte, binucleate (X). Notare nella figura i due diversi stati dell epitelio quando la vescica è contratta o rilassata. Tra gli epiteli semplici si potranno riconoscere, a seconda dell'altezza delle cellule, oltre all epitelio pavimentoso semplice sopra menzionato,, l epitelio cubico semplice (es. quello della superficie dell'ovaio) e l epitelio cilindrico semplice (es. dell intestino). In quest'ultimo si potrà rilevare che esistono, nella sua compagine, cellule caliciformi mucipare (ghiandole unicellulari Y).

3 Cellule caliciformi mucipare sono presenti anche negli epiteli pseudostratificati (vedi sopra). Esse sono riconoscibili per la forma a calice, nucleo basale e regione sopranucleare dilatata, poco colorabile dopo E.E., a volte celeste dopo Azan-.Mallory, blu dopo Alcian e rosso magenta dopo PAS (vedi appunti di tecniche). A2 -Trattasi di TESSUTO EPITELIALE GHIANDOLARE? Ogni ghiandola è da considerarsi un organo ove sono presenti vari tessuti che si integrano tra di loro. Il tessuto principale è quello epiteliale secernente, che forma il parenchima. Il tessuto connettivo va a formare sia la capsula delimitante la ghiandola sia l'impalcatura di sostegno dell' organo, lo stroma, che circonda l epitelio ghiandolare. Sono presenti anche vasi e nervi. Nelle ghiandole le cellule epiteliali ghiandolari non sono organizzate in lamine cellulari (che rivestono una qualsiasi superficie, come negli epiteli di rivestimento), ma sono disposte in gruppi cellulari a formare strutture solide piene o cave, circondate dal tessuto connettivo, con interposta sempre una membrana basale. A questo punto si tratterà di stabilire dapprima se trattasi di ghiandola esocrina o di ghiandola endocrina. Trattasi di TESSUTO EPITELIALE GHIANDOLARE ESOCRINO? Nella GHIANDOLA ESOCRINA tra il tessuto connettivo che forma la capsula delimitante la ghiandola e quello dell'impalcatura di sostegno dell'organo saranno presenti, oltre a sezioni di vasi e di nervi, anche sezioni di strutture canalizzate, tappezzate da un epitelio, riferibili sia ai dotti escretori delle ghiandole, sia soprattutto alle unità secernenti, gli adenomeri. Sarà possibile, a volte, notare anche il punto di raccordo fra adenomero/i (acino, tubulo o alveolo che sia) e il dotto escretore. dotti adenomeri

4 -Se trattasi di ghiandola esocrina si dovranno rilevare i seguenti dati: a) in base al numero dei dotti escretori rispetto al numero di adenomeri, stabilire se trattasi di ghiandola semplice, ghiandola ramificata, ghiandola composta. Le prime tre sono riconoscibili in sezione longitudinale, l'ultima anche in sezione trasversale (presenza di tanti adenomeri e pochi dotti). b) In base alla forma degli adenomeri, riconoscere più o meno se trattasi di ghiandola tubulare, glomerulare, alveolare o acinosa o se sono rappresentati più tipi di adenomeri (tubulo-alveolare o tubulo-acinoso). -Come si riconoscono i dotti rispetto agli adenomeri in microscopia ottica? Le cellule della parete dei dotti hanno funzione prevalentemente di rivestimento e presentano il nucleo in posizione più o meno centrale (1). Nell'adenomero invece le cellule delimitanti il lume hanno il nucleo spostato verso la base (2), in quanto sono funzionalmente polarizzate. c) In base al tipo di secreto, riconoscere se la secrezione è di tipo sieroso (X) (il secreto appare accumulato nel segmento distale di ogni cellula in forma di minutissimi granuli colorati, il nucleo sferico è eccentrico verso il polo basale) o di tipo mucoso (Y) (in tal caso, il citoplasma appare vacuolare e semivuoto, il nucleo è appiattito e fortemente spostato alla base). L'aspetto vacuolare del citoplasma è conseguenza delle tecniche utilizzate per allestire normalmente le sezioni, per cui il muco, originariamente distribuito in gocciole nel citoplasma, viene in genere disciolto. d) In base alle modalità con cui il secreto viene eliminato dalle cellule precisare se trattasi di uno dei seguenti tipi di secrezione: - secrezione olocrina: il secreto si accumula in tutta la cellula; l'eliminazione di esso avverrà con distruzione totale dell'elemento cellulare stesso (osservare, nelle diverse cellule, le varie fasi della progressiva alterazione dei nuclei fino a scomparire), tipica modalità secretiva delle ghiandole sebacee della pelle. Per ogni cellula piena di grassi che si autodistrugge all interno dell adenomero, una nuova cellula, che nasce per mitosi di cellule proliferanti poste in periferia, va a sostituirla.

5 - secrezione merocrina (o eccrina) se il secreto viene elaborato con ritmo costante dalle cellule, tale che il citoplasma non risulti mai privo del secreto medesimo, il quale viene riversato all esterno per esocitosi di vescicole piene. Le cellule secernenti con queste modalità rimangono sostanzialmente integre e mantengono tutte la stessa altezza e gli stessi caratteri morfologici al microscopio luce (acino pancreatico). - secrezione apocrina: il secreto si accumula nella parte distale della cellula, poi viene versato tutto all'esterno in un unico atto, insieme a una parte del citoplasma apicale. Le cellule che si sono svuotate del secreto appariranno di minor altezza rispetto a quelle in cui il secreto risulta ancora accumulato nel citoplasma. E' evidente la differente altezza degli elementi epiteliali secernenti (gh. mammaria). Trattasi di TESSUTO EPITELIALE GHIANDOLARE ENDOCRINO? Nella GHIANDOLA ENDOCRINA mancheranno evidentemente i dotti escretori. In compenso le strutture ghiandolari sono a contatto stretto con la rete di vasi capillari. Le cellule potranno organizzarsi in strutture solide, di forma sferoidale od ovalare (i nidi) o più frequentemente in strutture solide, di forma allungata (i cordoni), oppure si disporranno a formare uno strato epiteliale semplice (fatto da cellule di varia altezza a seconda del loro stato di attività) che delimita cavità chiuse (i follicoli). Una ghiandola di tipo follicolare, ad esempio, è la tiroide; 1'adenoipofisi, per la gran parte fatta da nidi e cordoni di cellule, è provvista anch'essa di una parte a struttura follicolare. Trattasi della zona addossata all'ipofisi intermedia. In questo caso, saranno, però, anche le altre parti (neuroipofisi) della ghiandola ad orientare l'osservatore nel riconoscimento del preparato; tenete presente che qui i follicoli sono considerevolmente più piccoli rispetto a quelli della tiroide. (Eventuali colorazioni istochimiche metterebbero in evidenza che la colloide ipofisaria non contiene iodio). Nidi (Ni) e cordoni (Co) (tipici anche del surrene, delle paratiroidi, oltre che dell'adenoipofisi) sono un diverso modo di disporsi nello spazio di cellule secernenti che non evidenziano più una cavità piccola o grande che sia (lume dell adenomero), ma sono comunque delimitate esternamente da una calzamaglia di connettivo di tipo reticolare che le circonda e con in vicinanza un vaso capillare (Cap.) (vedi a lato).

6 Cap Nidi + vasi della adenoipofisi Cap Cordoni della zona corticale della surrenale Schema di follicoli tiroidei

7 Il fegato è una ghiandola detta labirintica ed è riconoscibile in quanto i cordoni si dispongono radialmente, come una ruota di carro, rispetto ad un vaso (vena centrolobulare), che fa da perno, delimitando lateralmente spazi occupati da vasi capillari dilatati (sinusoidi). Lobulo epatico Tubulo seminifero del testicolo Esistono infine anche cellule a secrezione endocrina sparse in altre strutture, ad esempio nel testicolo, come le cellule del Leydig, esterne ai tubuli.