PROTEINURIA Filtrato glomerulare Eliminazione di: (>150 mg/die) Tubuli renali mg/dl g/24 h - Proteine plasmatiche 99% riassorbito nel tubu

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Lelio Brunetti
7 anni fa
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1 Le Proteinurie Simona Brambilla Laboratorio Analisi 31 marzo Istituto Clinico Humanitas, IRCCS Rozzano, Milano

2 PROTEINURIA Filtrato glomerulare Eliminazione di: (>150 mg/die) Tubuli renali mg/dl g/24 h - Proteine plasmatiche 99% riassorbito nel tubulo prossimale - Proteine assenti nel plasma (es. proteina di Tamm-Horsfall) 1

3 IL LABORATORIO NELLE PROTEINURIE 1. Metodi qualitativi (di separazione) Elettroforesi zonale su gel, capillare 6 frazioni 2. Metodi semiquantitativi Strisce reattive albumina 3. Metodi quantitativi Immunoturbidimetrici proteine specifiche -Proteine totali -Albumina (microalbuminuria o paucialbuminuria) -Rapporto microalbuminuria/creatinina urinaria 2

4 CLASSIFICAZIONE STORICA DELLE PROTEINURIE 1. Proteinuria fisiologica 2. Proteinurie glomerulari -Selettive -Non selettive 3. Proteinurie tubulari 4. Proteinurie miste 5. Proteinurie per presenza in circolo di proteine anomale 6. Proteinurie post-renali 3

5 CLASSIFICAZIONE STORICA DELLE PROTEINURIE (1) Alb a1at a2mg Proteinuria fisiologica Al tracciato elettroforetico: Hp RBP Tf B2M Ig k l -Albumina poco evidente, minore delle globuline (30-40%) -Globuline non in bande ma in zona continua indifferenziata 4

6 CLASSIFICAZIONE STORICA DELLE PROTEINURIE (2) Proteinurie glomerulari (1) Le più frequenti proteinurie patologiche. Di entità molto variabile -Selettive Proteine con PM non molto elevato (< D): danno modesto Al tracciato elettroforetico: -Albumina 70-80% -Transferrina -Alfa-1, alfa-2 globuline poco accentuate (non sempre presenti) -Gamma globuline scarse (<10%) 5

7 CLASSIFICAZIONE STORICA DELLE PROTEINURIE (3) Alb Proteinurie glomerulari (2) -Non Selettive Proteine con PM più elevato (> D): danno più importante Il tracciato elettroforetico assume caratteristiche delle proteine sieriche: -Albumina 50-70% a1at a2mg -Alfa-2, beta globuline bene evidenti -Gamma globuline >10% Hp RBP Tf B2M Ig k l 6

8 CLASSIFICAZIONE STORICA DELLE PROTEINURIE (4) Alb a1at a2mg Proteinurie tubulari Solitamente di modesta entità Proteine con basso PM ( D) Microglobuline: beta-2 microglobulina di Berggard, Al tracciato elettroforetico: -Albumina scarsa (10-40%) alfa-2 microglobulina e lisozima -Beta globuline con diverse bande (beta-2 microglobulina) -Gamma globuline scarse o assenti Hp RBP Tf B2M Ig k l 7

9 CLASSIFICAZIONE STORICA DELLE PROTEINURIE (5) Alb a1at a2mg Proteinurie miste Combinazione di alterazione glomerulare e alterazione tubulare Al tracciato elettroforetico: -Albumina bene evidente -Alfa-2, beta globuline bene evidenti (beta-2 microglobulina) -Gamma globuline >10% Hp RBP Tf B2M Ig k l 8

10 CLASSIFICAZIONE STORICA DELLE PROTEINURIE (6) Proteinurie per presenza in circolo di proteine anomale Emoglobina, mioglobina, lisozima ma soprattutto proteina di Bence-Jones Proteina di Bence-Jones (PM D): nel 50% circa dei pazienti affetti da mieloma Al tracciato elettroforetico: -Marcata banda di tipo monoclonale fra la zona gamma e la zona alfa-2 (da confermare con immunosieri specifici) Non rilevabile con le classiche strisce reattive 9

11 CLASSIFICAZIONE STORICA DELLE PROTEINURIE (7) Proteinurie post-renali Perdita di proteine attraverso la vescica e le vie urinarie in genere, prostata Costantemente accompagnata da leucocituria 10

12 MICROALBUMINURIA (1) mg/min, mg/24 h, mg/l, mg/g creatinina -Danno iniziale della membrana glomerulare -Ancora reversibile se riconosciuto e trattato -Se non riconosciuto e trattato nefropatia Diabete insulino-dipendente (IDDM tipo I) 30-40% probabilità di nefropatia dopo 20 anni di malattia Diabete non insulino-dipendente (NIDDM tipo II) 15-20% probabilità di nefropatia ma maggiore prevalenza di malattia 11

13 MICROALBUMINURIA (2) 12 NEFROPATIA DIABETICA PROGRESSIVA -Proteinuria più o meno severa -Porta alla sindrome nefrosica (ipoalbuminemia, edema, progressivo aumento dell azotemia) -Proteinuria con perdita di g/die e diminuzione clearance creatinina -Aumento della soglia renale della glicosuria

14 MICROALBUMINURIA (3) 13 Metodica immunochimica, più sensibile rispetto alle strisce reattive Tipo di campione: prime urine del mattino Rapporto microalbuminuria/creatinina urinaria

15 LABORATORIO??

16 CV[%] 5,00 4,50 4,00 3,50 3,00 2,50 2,00 1,50 1,00 CONFRONTO FRA METODI 0,50 0, U-albumina [mg/l] MICROALBUMINURIA (4) 14 n= 9 U-albumina Abbott [mg/l] n= 90 y = 0,9913x + 0,9455 R 2 = 0, U-microalbumina Sentinel [mg/l] IMPRECISIONE ENTRO-LA-SERIE

17 U-albumina[mg/L] y=0,9969x + 3, ,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1 Frazioni di volume LIMITE DI SENSIBILITA MICROALBUMINURIA (5) 15 Deviazione standard [mg/l] 8,00 LINEARITA E RECUPERO 7,50 7,00 6,50 6,00 5,50 5,00 4,50 4,00 3,50 3,00 2,50 2,00 1,50 1,00 0,50 0, U-albumina [mg/l] Abbott

Albumina [mg/l] (attesa) INTERFERENTI -Glucosio- 700 600 500 400 300 200 100 MICROALBUMINURIA (6) 16 0 0 100 200 300 400 500 600 700 14200 mg/dl Glucosio [g/dl] 5.

18 Albumina [mg/l] (attesa) INTERFERENTI -Glucosio MICROALBUMINURIA (6) mg/dl Glucosio [g/dl] 5.98 Albumina [mg/l] (osservata) Recupero % mg/dl mg/dl Albumina [mg/l] (attesa) Albumina [mg/l] (attesa Albumina [mg/l] (osservata) Albumina [mg/l] (osservata)

19 Albumina [mg/l] attesa INTERFERENTI -Bilirubina mg/dl Albumina [mg/l] osservata MICROALBUMINURIA (7) Albumina [mg/l] attesa Bilirubina [g/dl] Urina + calibratore Urina + urina 4.00 mg/dl Recupero % ,0 100,0 200,0 300,0 400,0 500,0 600,0 700,0 800,0 900,0 Albumina [mg/l] Osservata 2 17

20 MICROALBUMINURIA (8) Albumina [mg/l] (attesa) 250 mg/l INTERFERENTI -Emoglobina ,0 200,0 400,0 600,0 800,0 1000,0 1200,0 500 mg/l Emoglobina [mg/l] 250 Albumina [mg/l] (osservata) Recupero % mg/l Albumina [mg/l] (attesa) Albumina [mg/l] (attesa) ,0 200,0 400,0 600,0 800,0 1000,0 1200,0 1000,0 Albumina [mg/l] (osservata) 900,0 800,0 700,0 600,0 500,0 400,0 300,0 200,0 100,0 0,0 0,0 100,0 200,0 300,0 400,0 500,0 600,0 700,0 800,0 900,0 1000,0 Albumina [mg/l] (osservata)

21 Definire con i clinici la modalità di raccolta del campione: valutazione più omogenea dei pazienti (diagnosi, prognosi e risposta alla terapia) L utilità dello studio della proteinuria è subordinata ad una corretta impostazione metodologica oltre che interpretativa 19

22 GRAZIE

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