Parassitologia (modulo 5CFU)

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1 Corso di Laurea Magistrale in Scienze Biologiche Indirizzo Diagnostica molecolare Anno Accademico 2018/19 METODOLOGIE EPIDEMIOLOGICHE e PARASSITOLOGICHE e Laboratorio Parassitologia (modulo 5CFU) Prof. Anna Scandurra 1 Università degli Studi di Napoli Federico II

2 2 Classificazione Phylum Nemathelminthes Classe Nematoda Ordine Rhabditida Famiglia Strongyloididae Genere Strongyloides Specie Strongyloides stercoralis

3 Strongyloides stercoralis 1. Le larve rabditoidi escono dall ospite definitivo 3 Ciclo biologico con le feci. Possono nutrirsi di batteri. Una volta all esterno, queste larve possono svilupparsi con modalità differenti. 2. Una delle possibili modalità è il ciclo sessuato indiretto. Le larve aplodi o diploidi vanno incontro a 4 mute e si trasformano in individui maschi (aploidi) e femmine (diploidi). Queste femmine conducono vita libera e sono morfologicamente diverse dalle forme femminili parassite. I due sessi si accoppiano. I maschi sono dotati di gubernaculum, una struttura formata da chitina che serve da guida per gli spicoli durante l accoppiamento.

4 Strongyloides stercoralis 4 Ciclo biologico 3. Le uova trasparenti sono rilasciate nel terreno. 4. In poche ore le uova si schiudono e la larva rabditoide viene liberata. 5. In seguito a 2 mute, diventa larva strongiloide che necessita dell ospite entro 2 settimane al massimo. 6. Le larve strongiloidi entrano nella pelle dell uomo e, attraverso il circolo sanguigno, raggiungono il cuore e i polmoni. [1 6] Può esistere anche un ciclo diretto in cui le larve rabditoidi derivanti da uova triploidi possono accrescersi, nutrirsi e, dopo 2 mute, trasformarsi in larve strongiloidi.

5 Strongyloides stercoralis 7. Attraverso il circolo sanguigno, le larve arrivano 5 Ciclo biologico al cuore e ai polmoni. Da qui, risalgono la trachea, per poi raggiungere l esofago e l intestino. 8. Qui le larve hanno 2 mute e diventano femmine adulte partenogenetiche. 9. Le uova sono prodotte e schiudono e, dopo circa 30 giorni dall ingresso nell ospite, le larve rabditoidi arrivano alle feci. 10. Più raramente, può esistere un autoinfestazione esterna (le larve rabditoidi diventano strongiloidi nella zona perianale e migrano nella cute) o interna (lo stesso iter, ma nell intestino, con la successiva invasione di altri tessuti).

6 6 Strongyloides stercoralis Ciclo biologico 1. Il

7 7 Strongyloides stercoralis In alcune zone esistono serbatoi animali quali il cane e il gatto, ma la trasmissione avviene normalmente da individuo ad individuo. In Italia si registrano una cinquantina di casi ogni anno, specialmente nelle zone rurali. Nei soggetti in cui il sistema immunitario non è compromesso, il parassita viene eliminato spontaneamente. I sintomi possono essere legati alla penetrazione delle larve, con prurito e dermatite locale, oppure a problemi respiratori durante la migrazione delle larve. Se l infestazione è cronica, comunque, è tendenzialmente asintomatica. Considerando che nelle feci non ci sono uova, la possibilità di fare una diagnosi dalle feci dipende dal numero di larve presenti. Una tecnica efficace è quella di far fuoriuscire le larve mettendo il campione fecale a contatto con l acqua. Le larve rabditoidi presentano un caratteristico movimento a frusta. Il trattamento farmacologico è possibile ed efficace ma con profilassi periodica.

8 8 Classificazione Phylum Nemathelminthes Classe Nematoda Ordine Enoplida Famiglia Trichinellidae Genere Trichinella

9 9 Genere Trichinella 1. Le larve al primo stadio, presenti nei muscoli di un Ciclo biologico animale parassitato, possono passare al successivo ospite tramite ingestione di carne cruda/poco cotta. 2. Sono rilasciate nello stomaco. 3. Si dirigono nell intestino, parassitando un centinaio di cellule. In circa 30 ore hanno 4 mute, diventano adulte e la femmina è fecondata dal maschio. 4. Le larve newborn (da un centinaio ad un migliaio) sono rilasciate dalle femmine e raggiungono il flusso sanguigno. Le femmine rilasciano larve per una decina di giorni, poi il sistema immunitario le espelle insieme ai maschi. Tutta questa parte del ciclo è indicata come fase intestinale.

10 10 Genere Trichinella Ciclo biologico 5. Il ciclo può continuare solo per quelle larve che raggiungono i muscoli (fase parenterale). Una volta penetrate nelle cellule muscolari, le trasformano in cellule nutrici e si accrescono senza andare incontro ad ulteriori mute. In alcune specie si forma una cisti costituita da una capsula di collagene. La larva assume una forma a spirale. Nelle specie senza capsula, le larve si muovono liberamente da una cellula all altra. Il tempo di resistenza nelle cellule è molto variabile, può prolungarsi anche per decine di anni. Il metabolismo anaerobio della larva le permette di resistere per lungo tempo nelle cellule muscolari di organismi morti. Una serie di fattori possono portare la capsula e poi la larva a calcificarsi, portando alla morte del parassita.

11 11 Genere Trichinella Delle 8 specie appartenenti al genere, le 5 che presentano la capsula sono: T. spiralis cosmopolita, ben adattata tra roditori e suini T. nativa zone artiche e subartiche T. britovi zone temperate dell Asia T. murrelli Stati Uniti T. nelsoni Africa sub-sahariana Le altre 3 specie (T. pseudospiralis, T. papuae e T. zimbabwensis) non sono incapsulate.

12 12 Genere Trichinella La parassitosi può avere un ciclo silvestre in natura, oppure un ciclo domestico negli animali di allevamento. Negli animali la trichinellosi è asintomatica. Nell uomo ci sono vari gradi di infezione, passando così da forme asintomatiche a forme benigne e gravi. Nella fase acuta possono insorgere febbre, edema periorbitale a livello del viso o degli arti, emorragie della congiuntiva. La durata della sintomatologia può dipendere dalla forma della trichinellosi, ma generalmente è di un paio di settimane. I sintomi sono accomunati da ipersensibilità provocata dalla risposta del sistema immunitario all attacco del parassita (sono prodotte citochine ed anticorpi). Le larve del parassita si possono diagnosticare tramite una biopsia muscolare. Il trattamento farmacologico si avvale di corticosteroidi ed antielmintici che devono essere utilizzati nelle prime fasi dell infezione. Successivamente, infatti, le larve non sono più attaccabili perché protette all interno delle cellule muscolari. La cottura della carne a 65 C uccide le larve.

13 13 Classificazione Phylum Nemathelminthes Classe Nematoda Ordine Ascaridida Famiglia Anisakidae

14 Famiglia Anisakidae 14 Ciclo biologico

15 15 Famiglia Anisakidae In base alla localizzazione si possono distinguere una forma di anisakidosi gastrica e una intestinale. Nel primo caso la forma acuta prevede vomito e nausea nelle 5 ore dopo l ingestione del parassita. Nel caso dell anisakidosi intestinale, si hanno dolori addominali, febbre, diarrea, vomito e sangue nelle feci a distanza di una settimana dall ingestione. Le larve possono essere diagnosticate tramite tecniche endoscopiche e identificazione delle specie con tecniche molecolari (PCR). I trattamenti farmacologici non risultano utili, quindi l unica strategia è la rimozione diretta del parassita. La prevenzione si basa principalmente sulla cottura e sul congelamento del pesce pescato.

16 16 Classificazione Phylum Nemathelminthes Classe Nematoda Ordine Oxyurida Famiglia Oxyuridae Genere Enterobius

17 Genere Enterobius 1. Di notte, la femmina gravida depone circa Ciclo biologico uova e poi muore. Lo strato esterno del guscio ha 17 proprietà adesive, permettendo la formazione di placche nella zona perianale dovute all unione di più uova. In circa 6 ore, le larve compiono 2 mute e maturano nelle uova. 2. L uomo ingerisce le uova all interno delle quali le larve sono al terzo stadio. 3. Le larve si liberano nel duodeno e vanno verso l ileo e il digiuno, dove fanno altre 2 mute. 4. Nel cieco le larve raggiungono la maturità. 5. Verso il ventesimo giorno dall infestazione, le femmine gravide accumulano le uova negli uteri, si spostano verso l ano e raggiungono le pliche muco-cutanee perianali.

18 18 Genere Enterobius La parassitosi è piuttosto cosmopolita e particolarmente diffusa tra i bambini. Enterobius vermicularis può infestare ciclicamente lo stesso ospite grazie al comportamento dell ospite: la presenza delle femmina gravida che morde la mucosa nella zona perianale provoca prurito a livello locale, inducendo l ospite a grattarsi. Le dita sporche possono poi infestare oggetti, cibo o reinfestare l ospite se si porta le mani alla bocca. Molte enterobiosi possono essere asintomatiche con una bassa carica parassitaria. Se la carica è alta, si può manifestare perdita dell appetito, dimagrimento, cambiamenti dell umore, prurito anale, insonnia e irritabilità. La diagnosi può essere effettuata con la ricerca delle uova, grazie ad un nastro adesivo da appoggiare nella zona perianale e la successiva osservazione al microscopio (da ripetere per almeno 3 giorni). I farmaci possono eliminare il parassita ma con trattamenti settimanali ripetuti.

19 19 Classificazione Phylum Nemathelminthes Classe Nematoda Ordine Spirurida Famiglia Dracunculidae Genere Dracunculus Specie Dracunculus medinensis

20 Dracunculus medinensis 20 Ciclo biologico

21 21 Dracunculus medinensis La migrazione della femmina gravida nei tessuti sottocutanei avviene un anno dopo l inizio della parassitosi. Ogni femmina gravida contiene circa di larve rabditoidi che sono rilasciate insieme ad un essudato biancastro quando l utero protrude a contatto con l acqua. La prevenzione si basa sull evitamento di pozzi che prevedano l immersione dei piedi in acqua, con mirate strategie di educazione sanitaria e con il controllo degli ospiti intermedi. Non esiste ancora una terapia specifica e la femmina adulta può essere eliminata dal corpo attraverso l uso di un bastoncino sul quale arrotolarla. La procedura è molto lunga e può richiedere diversi giorni, prevedendo un trattamento anestetico che paralizzi il parassita.